病理検査 固定
【目的】
・組織、細胞の自己融解防止
・生きていた状態になるべく近い状態の構造をとらえる
・染色性を高める
【原理】
・水、帯電による「ゾル」 ⇒ 水除去、帯電変化により「ゲル」へ
・量−組織片の5〜10倍
・時間−過不足により染色性阻害
・変形防止
脳−脳底動脈下に糸をくぐらせ吊る
肺−気管支注入固定
胃・腸−板にピンでとめる
腎・脾−割を入れる(被膜)
ホルマリン系固定液
【10%ホルマリン】
・ホルムアルデヒド 3.7%
【中性ホルマリン】
・ホルマリン+CaCo3またはMgCo3
・密閉しない
・2〜5日
【リリー緩衝ホルマリン】
・ホルマリン+第一リン酸Na+第二リン酸Na
【等張ホルマリン】
・10%中性ホルマリン+NaCl
【ブアン液】
・ホルマリン+ピクリン酸+氷酢酸
・1〜2時間
アルコール系固定液
【純アルコール】
・脱水、脱脂作用が強い(収縮、硬化、TG溶解)
・○−糖原、粘液、鉄、核酸
・×−脂肪
【カルノア液】
・純エタノール+クロロホルム+氷酢酸
・長時間入れると収縮、溶血
アセトン系固定液
【アセトン】
・5℃で用いる
・ホスファターゼ、リパーゼ、エステラーゼ
重クロム酸系固定液
【ミューラー】
・重クロム酸カリウム
【オルト】
・重クロム酸カリウム+ホルマリン
【ヘリー】
・重クロム酸カリウム+ホルマリン+昇汞
【ツェンカー】
・重クロム酸カリウム+氷酢酸+昇汞
【スーサ】
・重クロム酸カリウム+氷酢酸+昇汞
【マキシモウ】
・重クロム酸カリウム+氷酢酸+昇汞+ホルマリン
電子顕微鏡の固定
【前固定】
・2〜4%グルタールアルデヒド
【後固定】
・2〜4%四酸化オスミニウム
酵素抗体法の固定
【4%PFA】
・パラホルムアルデヒド・・・蛋白系抗原
【PLP】
・PFA+メタ過ヨウ酸Na+リン酸緩衝液
【ザンボーニ】
・PFA+ピクリン酸
脱灰
【脱灰】
・骨、歯、石灰化、結石等、固定後、包埋前に処理
・室温15℃、蓋をしない
・過脱灰−核の染色性低下
【迅速脱灰法(Plank-Kycho)】
・塩化アルミニウム+ギ酸+塩酸 ⇒ 5%硫酸Na(中和)
【その他】
・酸−硝酸、ギ酸、塩酸、TCA
・EDTA
・イオン−交換樹脂
・電気脱灰法−炭素棒(陽極側に!)