微生物の染色
単染色
レフレルのメチレンブルー
グラム染色
1.塗抹、乾燥、固定
2.ハッカーのクリスタルバイオレット
3.水洗
4.ルゴール液
5.水洗
6.脱色(純エタノール)
7.水洗
8.サフラニン
9.水洗、鏡検
抗酸染色
チールネルゼン染色(加熱、チールの石炭酸フクシン、3%塩酸アルコール)
芽胞染色
ウイルツ法(マラカイト緑、サフラニン)
メラー法
バシラス、クロストリジウム
異染小体染色
ナイセル法
ジフテリア
鞭毛染色
レイフソン法
コレラ、緑膿菌、腸内細菌
莢膜染色
ヒス法(ゲンチアナ紫、フクシン)
肺炎球菌、肺炎桿菌、インフルエンザ
墨汁法
クリプトコッカス検出
培地と試験
非選択培地
普通寒天培地
血液寒天培地
チョコレート寒天培地
BTB乳糖加寒天培地
選択分離培地
マンニット食塩培地
要滅菌、耐・好塩性菌発育
Sta.aureus
C-マンニット、pH-フェノールレッド、選択-7.5%NaCl
Staphylococcus No110培地
要滅菌、耐・好塩性菌発育
Sta.aureus
C-マンニット、pH-BTB、選択-7.5%NaCl
食塩耐性、マンニット分解能、ゼラチン液化能、色素産生能
EF寒天培地
Enterococcus faecalis
C-Glucose、pH-BTB、選択-0.025% 窒化Na、テトラゾリウム塩
DHL寒天培地
腸内細菌科
N-ペプトン、C-白糖、ブドウ糖、pH-ニュートラル赤、選択-胆汁酸塩、チオ硫酸Na、クエン酸Fe
マッコンキー寒天培地
N-ペプトン、C-乳糖、pH-クリスタル紫、選択-胆汁酸塩、チオ硫酸Na、クエン酸Fe
E.coli・・・乳糖⇒酸 混濁、レンガ紅色
Salmonella・・・乳糖非分解 無色コロニー
Shigella・・・胆汁酸析出なし
SS寒天培地
N-ペプトン、C-乳糖、pH-ブリリアント緑、選択-胆汁酸塩、チオ硫酸Na、クエン酸Fe
NAC寒天培地
Pseudomonas aerginosa以外のGPC、GNRを発育抑制
選択成分−ナリジクス酸、セトリマイド
TCBS寒天培地
Vibrio科
C-白糖、pH-BTB、選択-チオ硫酸Na、クエン酸、胆汁酸塩、pH8.6
黄色コロニー コレラ
緑色コロニー 腸炎ビブリオ
ビブリオ寒天培地
Vibrio科
C-白糖、pH-クレゾール赤、ウォーター青、選択-チオ硫酸Na、クエン酸、タウロコール酸Na、ラウリル酸Na
サイヤーマーチン
Nisseria
バンコマイシン、コリスタチン、ナイスタチン
スキロー培地
Canphylobacter jejuni
バンコマイシン、ポリミキシンB、ヒツジ血液5%
荒川培地
1%亜テルル酸K
Corinebacterium diphtheriae
レフレル培地
ウマ血清7.0%
Corynebacterium diphtheriae
CCFA培地
Clostridium difficile
サイクロセリン、セフォキシチン
BCYE寒天培地
Legionella
PPLO寒天培地
Mycoplasma
ウマ血清、2.5%酢酸タリウム、PCGカリウム塩
小川培地
抗酸菌
リン酸2水素K・全卵70%
コルトフ培地
Lestospira
ボルデジャング
Bordetella
ジャガイモ、グリセリン
コーンミール寒天培地
非選択 真菌
サブロー培地
選択 真菌
PCG、SM、CP
培地&テスト
グラム陽性球菌
Staphylococcus
マンニット食塩培地7.5%
コアグラーゼtest
バンコマイシン感受性
Streptcoccus
血液寒天培地、トッドヒューレット、パイク培地
普通寒天培地×
pyogenes−バシトラシン感受性試験、ディックテスト
agaracctie−CAMPテスト
pneumoniae−オプトヒン感受性、胆汁酸溶解、莢膜膨化test
D群連鎖球菌
SF培地(胆汁エスクリン加水分解(+)
EF培地(Enterococcus)6.5%食塩
グラム陽性桿菌
Corinebacterium diphtheriae
荒川培地(1%亜テルル酸K)
レルフル培地(ウマ血清70%)
エレクテスト、シックテスト、異染小体(ナイセル染色)、モロニー反応
Nocardia
小川培地
サブロー培地
Mycobacterium
小川培地(マラカイト緑、リン酸2水素K、全卵70%)
キルヒナー、デュボス(液体培地)
tubercrosis ・・・ ツベルクリン反応
leprae ・・・ レプロミン(光田)反応
Bacillus
パールテスト(縮毛状:R型)
アスコリ熱沈降反応
Clostridium
CCFA培地(difficile)
parfringens ・・・ ナグラー反応(嵐状発育)
グラム陰性球菌
Neisseria
サイヤーマーチン培地(Hb、バンコマイシン、コリスタチン、ナイスタチン)
チョコレート寒天培地
普通寒天培地×
グラム陰性桿菌
Legionella
BCYE寒天培地(非選択 ピンポイントコロニー)
WYO培地(選択培地)
Bordetella
ボルデジャング培地(ジャガイモ、グリセリン)
吹き付け平板法
グンデルテスト
Haemophilus
衛星現象
Vibrio parahaemolyticus
神奈川現象
Canpylobactor jejuni
スキロー培地(バンコマイシン、ポリミキシン、5%SRBC)
スピロヘータ
Lestspira
コルトフ培地(ウサギ血清)
Mycoplasma pneumoniae
PPLO培地(ウマ血清、2-5%酢酸タリウム、PCG、酵母エキス)
目玉焼きコロニー
真菌
コーンミール寒天
サブロー培地
マイコセル寒天培地(CF)
人工培地不可
Mycobacterium lepre ・・・ 培養不可
Toreponema ・・・ ウサギ睾丸
クラミジア、リケッチア、ウイルス ・・・ 培養細胞、発育鶏卵、マウス
培地&テストA
検体 ⇒ 分離 ⇒ Gram染色
グラム陰性桿菌 ⇒ オキシダーゼ試験
グラム陽性球菌 ⇒ カタラーゼ試験
チトクロームオキシダーゼ試験
2塩酸テトラメチルパラフェニレンジアミン
オキシダーゼ産生菌⇒インドフェノールブルー
カタラーゼ試験
3%過酸化水素
カタラーゼ産生⇒水+酸素
O−Fテスト
1%Glucose、BTB
ブドウ糖−発酵or酸化的分解?
硫化水素産生
TSI、クリグラー、SIMの高層部で確認
PPA反応
フェニルアラニンを基質とする脱アミノ反応
フェニルピルビン酸
クエン酸鉄と反応しキレート形成(茶褐色)
IPA反応
トリプトファンを基質とする脱アミノ反応
インドールピルビン酸
クエン酸鉄と反応しキレート形成(茶褐色)
インドール反応
トリプトファナーゼ産生能
トリプトファン⇒ピルビン酸+アンモニア+インドール
インドール+コバック試薬(パラジメチルアミノベンツアルデヒド)
⇒ロスインドール(赤)
VP反応
ブドウ糖⇒ピルビン酸⇒アセトイン(>pH6)
T液−5%αナフトール
U液−KOH
MR反応
ブドウ糖⇒ピルビン酸⇒強酸(ギ酸、乳酸、酢酸)
MR試薬
確認培地
TSI寒天培地
炭素源(ブドウ糖0.1%、乳糖1%、白糖1%)
窒素源(ペプトン)
pH(フェノールレッド)
硫化水素(チオ硫酸Na、硫酸第一鉄、亜硫酸Na)
硫化水素産生能、ガス産生性、糖の分解性
マロン酸塩培地
炭素源(マロン酸Na、ブドウ糖)
窒素源(硫酸アンモニウム)
pH(BTB)
リン酸緩衝液
マロン酸を利用⇒アルカリ化(青)
klebsiella、Enterobacter
シモンズのクエン酸培地
炭素源(クエン酸Na)
窒素源(リン酸2水素アンモニウム)
pH(BTB)
クエン酸利用⇒アルカリ化(青)
窒素源利用能
SIM培地
窒素源(ペプトン)
硫化水素(チオ硫酸Na)
運動性、硫化水素産生、IPA反応、インドール反応
LIM培地
窒素源(ペプトン)
炭素源(ブドウ糖、L-lysine)
pH(BCP)
DNエース
DNA-トルイジンブルー
DNase産生能
DNA分解酵素によりDNA+トルイジンブルー(赤紫)